1）

       對于哺乳動物細胞在自然的溫度生長最好，CO2 氣體維持在體內pH 值，類似于在血液中二氧化碳CO2 濃度；高濕度能防止培養基的蒸發；所有這些環境參數確保細胞正常表達蛋白質。

       適當的培養環境對于敏感的原代細胞和干細胞尤其重要。

       但是每次打開二氧化碳培養箱的門時，培養箱內的條件受到實驗室環境影響急劇變化。

       一旦關上門，培養箱重新快速恢復設置參數。

       細胞是否能長時間在設定條件下生長,取決打開培養箱門的時間和頻次,培養箱結構和反饋調節系統。

       2）

       CO2鋼瓶必須使用在優質二級的二氧化碳壓力閥。CO2培養箱輸入壓力必須保持在15±5psi (1 Bar)，使CO2控制系統正常運作。簡單的單級調節無法保持這種壓力，這將導致二氧化碳的濃度控制不精準。

       采用99.5％純度醫用級的CO2氣體內雜質少，可以減少對細胞產生負面影響。CO2氣體鋼瓶需備有二級的二氧化碳壓力閥，并設定到培養箱中的輸入壓力在15psi（1bar）。連接管道到空氣過濾器，然后到二氧化碳培養箱的背面標有鋸齒狀的接頭，一定要使用軟管夾，并檢查是否漏氣。當培養箱已正常運行24小時，用其他機構校驗的溫度計校準溫度，并用二氧化碳測定儀或外部IR測量計檢查CO2濃度。

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